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关于Kromasil色谱柱活化指南

更新时间:2023-10-09  |  点击率:1680

每当购买一根新色谱柱时,活化冲洗是一个必须操作的步骤。

全新色谱柱一般都是保存在一定的保护液中的。活化的目的是将新柱中的封存液替换,并且冲洗掉色谱柱中的杂质。还可以排除色谱柱中有机溶液的挥发所产生的气泡残留,发挥色谱柱的效能。不仅如此,活化还能使色谱柱内硅胶上的键合基团达到更好的排列,有利于样品的分离。

                         

Kromasil色谱柱根据不同固定相情况,推荐以下活化方法,其他品牌色谱柱需要在咨询厂商技术工程师确认后进行参考。


1、反相色谱柱(C18、C8、Phenyl、PhenylHexyl等)

①    80%甲醇(乙腈)-水溶液,低流速冲洗20-30个柱体积;

②    50%甲醇(乙腈)-水溶液,低流速冲洗20-30个柱体积;

③    初始比例流动相平衡10-30个柱体积。

*若流动相中含有缓冲盐,则需要在步骤③中采用无缓冲盐的初始比例流动相进行平衡后,额外增加步骤④使用含有缓冲盐得初始比例流动相平衡10-30个柱体积。


2、正相色谱柱(SIL、NH、CN等)

①    流动相平衡20-30个柱体积;

*若需要在反相条件下使用氨基、氰基等固定相的正相柱,需要参照以下步骤执行:

①    100%异丙醇溶液冲洗50-100个柱体积;

②    初始比例流动相平衡20-30个柱体积。


3、HILIC色谱柱(HILIC-D等)

①    50%乙腈-水溶液冲洗50个柱体积;

②    初始比例流动相平衡10-20个柱体积。


注意:任何含有缓冲盐的流动相都需要在无缓冲盐的初始比例流动相充分平衡后方才使用含有缓冲盐得溶液进行平衡,否则将出现盐析等不可逆色谱柱损害。并且,在进行色谱柱活化及使用时需要反复确认溶液间的互溶性。

 

以下为常见Kromasil色谱柱出厂封存溶液参考

固定相

封存溶剂

C18、C8、C4、Phenyl

甲醇-水溶液

C18(w)、EternityXT系列、HILIC-D

乙腈-水溶液

Sil、Diol、NH、CN

庚烷-乙酸乙酯溶液

 

 

 

 

 

 

 

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鲲霆生物现为Nouryon旗下品牌Kromasil液相色谱柱及制备填料中国区总代理。主营业务为代理销售各类实验室精密仪器、试剂耗材以及相关领域的技术开发与咨询服务。
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