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HPLC分析中溶剂效应成因及解决方案

更新时间:2023-06-06  |  点击率:707

日常液相分析中,我们时常会听到一个名词叫溶剂效应。溶剂效应在方法开发、药典方法重现时经常会遇见。当发生溶剂效应时,会发现色谱图有峰前沿、峰变宽、峰分裂乃至出现不出峰等问题。



何为溶剂效应?

溶剂效应顾名思义,可以理解为溶剂产生的效应。此处的溶剂指的是溶解样品的溶剂,也称样品溶剂,或称Solvent等。溶剂效应意为上样溶剂对色谱分离或化合物峰形产生的影响或作用。最为常见的情况为上样溶剂比初始比例流动相洗脱能力强,此时就有可能产生溶剂效应,对化合物峰形产生不利影响。


进样过程中溶剂效应的产生

在样品进样过程中,通常会经过几个阶段,样品吸取、样品输送、样品进入色谱柱等。在这几个阶段中,样品进入色谱柱时会发生瞬间扩散,使得整体系统中,溶液体系不再均匀。此时便可能会产生溶剂效应。先行进入色谱柱的上样溶剂+样品分子会瞬间扩散至色谱柱平衡过程中的初始比例流动相。但是随着样品全部进入,此时后面进入色谱柱的样品分子所处在溶剂变为了初始比例流动相+上样溶剂。则会产生一个现象,部分样品分子行进速度出现了“异常"。从化合物峰形上分析就会发现,本来对称的高斯峰,出现了分裂、变宽、拖尾等情况。

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溶剂效应的解决方案

 修改上样溶液

将上样溶剂修改为初始比例流动相是最为理想的方法与解决方案,但是如果是药典方法或标准方法对于此项修改或需要进行方法验证,费时费力。

 修改进样体积

修改进样体积通常会对溶剂效应有所改善,但是进样体积减小方法灵敏度也会有所损失。

 采用溶剂效应消除器

鲲霆生物溶剂效应消除器可有效消除,因进样溶剂与初始流动相洗脱能力差异导致的峰分裂,峰变宽,不出峰等问题。因使用药典、国标等方法无法修改的情况时,溶剂效应消除器是您解决进样峰形的理想之选。

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鲲霆生物溶剂效应消除器产品试用开放申请中,可联系我们申请试用。



产品特点

1、长使用寿命-Solvent-Smoother内无填料,通过特殊设计结构消除溶剂效应,以PEEK和不锈钢为材料的耐腐蚀设计,使用寿命长;

2、改善峰形- Solvent-Smoother可消除因溶剂效应引起的峰形前延,显著改善峰形对称性,柱效成倍提高;

3、兼具过滤功能- Solvent-Smoother内有筛板,可同时兼具在线过滤器的功能,拦截固体颗粒物质堵塞色谱柱筛板,使用后可取下超声清洗。


应用案例


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鲲霆生物现为Nouryon旗下品牌Kromasil液相色谱柱及制备填料中国区总代理。主营业务为代理销售各类实验室精密仪器、试剂耗材以及相关领域的技术开发与咨询服务。
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