制备柱的操作流程：从样品到产品

 

　　一、样品准备

 

　　首先，需要对样品进行预处理，以去除其中的杂质和不必要的成分。这通常包括过滤、稀释、溶解等步骤。特别是对于悬浮在样品中的颗粒物，建议使用0.45μm的滤膜进行过滤，以确保进入制备柱的样品尽可能纯净。

 

　　二、选择合适的产品

 

　　选择合适的产品是确保分离效果的关键。它的规格、填料种类和粒径需根据样品特性和分离需求来确定。例如，对于需要大量纯化的化合物，应选择具有较大粒径和内径的色谱柱，以承载更多的样品量。同时，键合相（如C18、C8等）和孔径的选择也需根据物质的分子量和分离需求进行调整。

 

　　三、安装与平衡

 

　　1.安装：取出产品，查看柱身流动相流向箭头标识，确保流动相流向与柱身所示一致。将连接管路的不锈钢或其他材质的接头旋入柱两端，确保连接紧密，无漏液现象。

 

　　2.平衡：在使用前需进行平衡处理。对于反相制备柱，通常先用纯甲醇冲洗约30个柱体积，以去除填料中的残留物。然后更换成能与检测流动相互溶的流动相，继续冲洗约30个柱体积，直至系统达到基线平衡。

 

　　四、样品进样与分离

 

　　将预处理后的样品注入制备柱中，通过调节流速和流动相比例，使样品在制备柱中进行分离。此过程中，需密切关注柱压变化，以确保分离过程的顺利进行。若柱压异常升高，可能是筛板堵塞或填料污染所致，需及时采取措施进行处理。

 

　　五、产品收集与后处理

 

　　当样品完成分离后，根据实验需求收集目标产物。收集后的产物可能需要进行进一步的后处理，如浓缩、干燥、重结晶等，以提高产物的纯度和稳定性。

 

　　六、维护与保养

 

　　使用完毕后，应进行清洗和保养。这包括用适当的溶剂冲洗柱子、更换管道系统中的滤膜和O型圈等。同时，对于长期不使用的产品，应将其从设备上取下并妥善保存，以防止填料沉淀和杂质附着。