高效液相色谱柱的储存与维护保养规范

 

　　一、科学储存：筑牢性能防护基础

 

　　色谱柱储存需严格控制环境与溶剂条件，避免固定相降解或柱床损伤。短期储存（1周内）若不拆柱，需使用初始流动相持续低流速（0.1-0.2mL/min）冲洗30分钟，排除柱内残留样品与杂质，随后密封两端接头，置于室温（15-25℃）、避光、干燥的环境中，严禁靠近有机溶剂挥发源。长期储存（超过1周）需根据固定相类型选择保护溶剂：反相柱（如C18）用80%甲醇-水或纯甲醇封存，正相柱（如硅胶柱）用正己烷-异丙醇（95:5）体系，离子交换柱则需用含相应离子的缓冲液浸泡，且每月需更换一次保护溶剂，防止微生物滋生或溶剂挥发导致柱床干涸。储存过程中需避免剧烈震动与温度骤变，柱盒需直立放置，禁止堆叠重物。

 

　　二、日常维护：把控使用关键环节

 

　　日常操作中的细节管控是维护色谱柱性能的核心。样品前处理需严格过滤（使用0.22μm或0.45μm滤膜）与脱气，避免颗粒物堵塞柱筛板或气泡产生柱空洞。开机时需采用“梯度升压”模式：初始压力设为操作压力的1/3，每分钟升高1-2MPa至目标值，防止压力骤升冲击柱床；分析结束后，需用不含缓冲盐的流动相（如甲醇-水）冲洗30-60分钟，清除柱内盐类，避免盐析结晶损伤固定相。此外，需严格控制柱温（波动范围±0.5℃）与流动相pH值（反相柱pH2-8，正相柱pH4-8），禁止使用强酸性或强碱性溶剂长时间冲洗。每次使用后需记录柱压、保留时间与理论塔板数，当柱压升高20%以上或理论塔板数下降15%时，需及时进行再生处理。

 

　　三、再生处理：恢复柱效延长寿命

 

　　针对不同污染类型需采用针对性再生方案。有机物污染（如样品残留）可通过梯度洗脱再生：反相柱依次用甲醇、乙腈、异丙醇各冲洗20柱体积，正相柱则用二氯甲烷-甲醇（90:10）体系冲洗；盐类污染需用5%-10%甲醇水溶液冲洗30柱体积，再过渡至纯甲醇；金属离子污染可使用0.05mol/LEDTA钠盐溶液（pH7.0）冲洗25柱体积，后续用纯水与甲醇依次过渡。再生过程中流速需控制在0.3-0.5mL/min，避免溶剂极性骤变导致固定相塌陷。再生后需通过标准样品测试柱效，若理论塔板数仍无法恢复至初始值的80%，则需判断色谱柱是否报废，禁止继续用于精密分析。

 

　　高效液相色谱柱的储存与维护保养需贯穿“预防为主、科学管控”的原则，通过标准化操作减少人为损伤，最大限度发挥色谱柱性能，为分析检测工作的准确性与稳定性提供保障。